Stil und Atmosphäre des Spiels basieren auf der Verfilmung des Comics "300: The Road to Glory" von Frank Miller unter der Regie von Zack Snyder. Der Film erzählt die vom griechischen Historiker Herodot geschilderte Schlacht um die Thermopylen, in der der Spartanerkönig Leonidas mit dreihundert seiner Leibgardisten eine gewaltige Übermacht der Perser zwei Tage aufhalten konnte und durch dieses Opfer die gesamte griechische Welt zum Krieg gegen die Invasoren aufrief. Der Spieler schlüpft in die Rolle des besagten König Leonidas und führt seine 300 tapferen Spartaner gegen den Perserkönig Xerxes und dessen gewaltige Armee. Mit Schwert, Speer, Schild und der Kampfkraft seiner Soldaten besiegelt er das Schicksal der westlichen Welt. "300: March to Glory" ist ein actionreicher und von spektakulären Schlachten geprägter Titel, in dem der Spieler als Einzelkämpfer oder an der Seite seiner Kameraden in die Schlacht ziehen kann.